AISLAMIENTO

Cuando una enfermedad causada por hongos no puede ser identificada facilamente a través de la consulta bibiligráfica, o la producción de signo en la cámara húmeda es necesario proceder al aislamiento.

El aislamiento consiste en limpiar con un algodón embebido en alcohol 70% el tejido vegetal enfermo, realizar pequeños cortes de la zona de avance de la infección, donde el patógeno está en activo desarrollo. Los trozos son esterilizados con una solución de hipoclorito al 1% durante 1 minuto, enjuagados con agua destilada estéril y sembrados en placas de petri con medios de cultivos específicos para hongos, la mayoría de las veces estos medios contienen sustancias bacteriostáticas para inhibir el crecimento de bacterias contaminanates. Las placas son incubadas en estufa a 20 o 25ºC por 4 a 5 días, posteriormente a partir de los trozos sembrados se verá el micelio del hongo, en función de los tipos de micelio desarrollaados será el número de repiques a realizar para llegar a obtener un cultivo puro. El repique consiste en extraer del borde de la colonia un trozo de agar con micelio, sembrarlo en otra placa de petri conteniendo medio nutritivo para hongos pero sin sustancias bacteriostáticas, e incubar las placas a 20 o 25ºC durante el tiempo que demore la formación de las estructuras reproductivas necesarias para la identificación del hongo.

Aislamiento a partir de fruto de zapallo	Repique, cultivo puro